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11月30日,中国科学院生物物理研究所叶克穷课题组在《中国科学:生命科学(英文版)》(Science China Life Sciences)上,在线发表了题为Complicated target recognition by archaeal box C/D guide RNAs的研究论文,揭示了古菌中2'-O-甲基化修饰全局图谱以及C/D RNA识别底物的新模式。
2'-O-甲基化修饰是RNA中频率最高的修饰之一,可影响RNA的结构、功能和稳定性等。C/D RNA在古菌和真核生物中广泛存在,指导底物RNA特定位点的2'-O-甲基化修饰。经典的C/D RNA通过碱基配对结合互补的底物,并挑选距离D/D'序列上游第5个碱基位点进行修饰,这被称为D+5规则。虽然已有关于古菌中C/D RNA的体外生化功能和结构的研究,但它们在体内的靶标和识别机制未有系统研究。
该研究系统测量了Sulfolobus islandicus古菌中rRNA、tRNA和高丰度sRNA上的2'-O-甲基化修饰,并鉴定了C/D RNA表达谱。该工作对指导修饰的C/D RNA进行了归属,对非经典的靶向规则进行了体外生化活性和遗传突变实验的验证。研究发现,C/D RNA广泛利用两条反义序列识别rRNA上相邻的位点,以该方式指导rRNA上79%的修饰。双重靶向的位点通常包含一个弱结合位点。生化实验证实双重靶向可以加强对弱结合位点的修饰。研究进一步发现,古菌具有双重特异性的向导序列,可同时指导两个相连位点的修饰。双重特异性向导在真核生物中存在,但只会属于D'向导,而古菌中可以属于D或D'向导。该研究首次发现了C/D RNA可以靶向单个非常规位点的修饰,包括D/D'序列上游第4、6和7个位点。该研究揭示了古菌中2'-O-甲基化修饰全局图谱以及C/D RNA识别底物的新模式。
研究工作得到国家自然科学基金、中国科学院战略性先导科技专项和国家重点研发计划等的支持。
双重靶向的C/D RNA
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