为解决以往检测技术难以分型和同时定量检测的问题，中科院过程工程研究所生化工程国家重点实验室研究员张松平、苏志国领导的团队利用毛细管区带电泳（CZE）技术，实现了对O/A双价灭活口蹄疫病毒疫苗抗原（FMDV）中O型、A型完整病毒的同时定量检测，为单价和双价FMDV疫苗质量控制提供了简单、快速、可靠的工具。相关研究近日发表于《色谱A》（Journal of Chromatography A）。
　　“单价疫苗”和“多价疫苗”里的“价”可以简单理解为微生物菌（毒）株中的血清型抗原。对含有多种血清型抗原成分的多价疫苗而言，每一种抗原的含量对疫苗质量都至关重要。
　　目前，多价疫苗抗原检测存在难以区分完整颗粒与亚病毒颗粒、裂解抗原，以及技术需要特定的PCR引物的问题。其中，高效液相凝胶过滤色谱（HPSEC）只能分离尺寸大小具有较大差异的样本，难以实现尺寸和分子量接近的样本分离。
　　随着多价FMDV疫苗的广泛应用，迫切需要一种能够同时定量疫苗中不同血清型病毒抗原的准确、简便的方法。
　　为应对这一挑战，在HPSEC检测技术基础上，研究团队提出利用CZE对多价口蹄疫病毒疫苗抗原FMDV同时进行O型、A型完整病毒颗粒的定量检测。
　　研究人员介绍，CZE的分离机制主要是在外加电场存在的情况下，基于不同组分的荷质比差异进行分离。实验中，基于CZE的原理，研究人员首先证实了采用CZE分离的理论基础，并进一步采用完整病毒颗粒146S为研究对象，发现在相关检测条件下，该方法表现出良好的重现性以及抗原含量对应峰面积的线性响应关系。
　　同时，他们利用不同血清型病毒粒子结构差异所导致的CZE迁移时间差异，实现了A/O双价146S的分离及定量，相对误差小于10%。
　　实验结果显示，与HPSEC方法相比，两种方法所得病毒总量的结果一致。而CZE检测不同血清型病毒具有不同的保留时间，从而可以分别定量检测。
　　据悉，相关技术日前已获得国家发明专利授权。
　　相关论文信息：https://doi.org/10.1016/j.chroma.2020.461834
　　（原载于《中国科学报》 2021-09-23 第4版 综合）